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羊IgG1 ELISA检测试剂盒使用说明 - 人生就是博-尊龙凯时

来源:严建雯 日期:2025-02-17

本试剂盒仅限于科研使用,不得用于医学诊断。使用羊免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA检测试剂盒时,请注意遵循相应的操作说明,确保结果的可靠性。

羊IgG1 ELISA检测试剂盒使用说明 - 人生就是博-尊龙凯时

检测试剂盒简介

本试剂盒基于酶联免疫吸附试验(ELISA)原理,采用双抗体一步夹心法检测羊免疫球蛋白G1(IgG1)。该方法利用预先包被的抗体与样本中可能存在的IgG1结合,通过后续的标记抗体反应实现定量检测。

检测原理

在预包被了IgG1抗体的微孔内,依次加入待测标本、标准品及HRP标记的检测抗体,随后进行温育和洗涤。最后添加底物TMB,在过氧化物酶的催化下生成蓝色产物,后在酸的作用下转变为黄色,颜色深浅与样本中IgG1的浓度成正相关关系。利用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

样品处理及保存方法

样品的收集和处理至关重要。对于血清样品,需使用不含热原和内毒素的试管,收集后进行离心以分离血清。血浆应使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,离心后取上清液。所有样品在未及时检测时应按一次用量分装并保存于-20℃,避免反复冻融。

操作注意事项

试剂盒应在2-8℃保存,使用前需在室温下平衡20分钟。注意,洗涤液中可能出现结晶,此现象正常,需用温水浴将其溶解后方可使用。此外,实验中未用的试剂板条应放回自封袋中密封保存,以保持干燥。

试剂盒组成

  • 96孔配置:微孔酶标板(12孔×8条)
  • 标准品:6管(每管0.3mL)
  • 样本稀释液:6mL
  • HRP标记检测抗体:10mL
  • 20×洗涤缓冲液:25mL
  • 底物A、B:各6mL
  • 终止液:6mL
  • 封板膜:2张
  • 说明书:1份

检测步骤

  1. 取出所需板条,设置标准品孔和样本孔,标准品各加不同浓度的标准品50μL。
  2. 样本孔中先加入待测样本10μL,再加入样本稀释液40μL;空白孔不加样本。
  3. 加入HRP标记的检测抗体100μL,封膜并在37℃下孵育60分钟。
  4. 弃去液体后进行洗涤,重复5次。
  5. 加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15分钟。
  6. 加入终止液50μL,15分钟内测定OD值。

结果判断

绘制标准曲线,使用Excel绘制标准品浓度与OD值的关系,通过曲线方程计算样本浓度。品牌人生就是博-尊龙凯时致力于提供高质量的生物医疗产品,确保您的研究获得最佳结果。

试剂盒性能

  • 准确性:标准品线性回归R值大于等于0.9900。
  • 灵敏度:最低检测浓度小于0.2g/L。
  • 特异性:不与其它可溶性结构交叉反应。
  • 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
  • 贮藏条件:在2-8℃避光防潮保存,有效期为6个月。

人生就是博-尊龙凯时提醒您,试剂盒仅供研究用,严禁用于临床或人体实验,一切后果由实验者承担。必须严格遵循操作说明,以确保实验结果的可靠性。

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