常用固定液的性质与应用

1. 单一固定液的性质和用途

（1）乙醇（C2H5OH）

乙醇，又称酒精，是一种有效的固定液。它可以沉淀白蛋白、球蛋白以及核蛋白，但由于后者易溶于水，故经过酒精固定的标本在细胞核染色上表现不佳。酒精虽能溶解脂肪及类脂体，因此不适合脂肪的固定。酒精能沉淀肝糖，但因肝糖易溶于水，经过酒精固定后不能在低于70%的酒精中保存。单独使用酒精的浓度应为95-100%。在与醋酸或氯仿混合使用时，酒精可增强它们的渗透力。此外，酒精还具备硬化和脱水的性质，固定后组织可在70%的酒精中保存，广泛应用于生物医药领域。由于无水乙醇容易挥发且吸湿，必需密封保存，并可加入少量无水硫酸铜以去除其中水分。由于酒精是一种还原剂，切勿与重铬酸钾或锇酸等氧化剂混合使用。

（2）甲醛（HCHO）

甲醛是一种气体，在水中形成甲醛水溶液（即福尔马林），通常使用10%福尔马林液，其配方为将10ml市售甲醛液与90ml蒸馏水混和，这样的配法已成为实验室的通用做法。甲醛不能沉淀白蛋白及核蛋白，但能与蛋白质形成化合物。它穿透力强、固定均匀、组织收缩小，广泛适用于一般器官的固定与保存，尤其对脂肪和神经组织的固定效果显著。固定时间一般要求在24小时以上，固定后的组织可以逐步转移至50%酒精中脱水。由于甲醛是强还原剂，不可与铬酸、重铬酸钾、锇酸等氧化剂混合，避免被氧化成甲酸。为保证甲醛溶液的中性，可在备用福尔马林中加入少量醋酸钙或碳酸镁作为中和剂。

（3）醋酸（CH3COOH）

醋酸在低温下会结冰，故又称冰醋酸，其融化温度约为17℃。醋酸具有较强的渗透力，能够有效沉淀核蛋白，对染色质的固定效果突出。它能较好地维护染色体的生物状态，因此在固定染色体时常与醋酸结合使用。醋酸的使用可以与其他药剂协同，抑制其它固定剂对组织收缩带来的不利影响，但醋酸不适用于线粒体和高尔基体的固定。

（4）呋喃酸（Picric Acid）

呋喃酸是一种带有强烈酸性的黄色结晶，溶于水、乙醇等。因其干燥时易自燃而需要湿性保存。它能够沉淀蛋白质，适合细胞质的固定，但穿透力较慢，且对组织会产生显著收缩，常常与醋酸等药剂联合使用。呋喃酸固定后的组织可能带有黄色，但少量残留对染色影响不大。

（5）重铬酸钾（K2Cr2O7）

重铬酸钾呈现橙红色结晶，具有毒性且为强氧化剂，不能与乙醇混合。它的穿透力强，能使蛋白质不再溶解，保持细胞质的相对结构。适用于线粒体和高尔基体的固定，但须与甲醛等药剂共同使用。经过重铬酸钾固定的组织需流水冲洗12-24小时。

（6）铬酸（H2CrO4）

铬酸为强氧化剂，呈红色或浅褐色，可潮解，常配成1%的水溶液使用。它是有效的沉淀剂，适合固定肝糖，并对线粒体及高尔基体的固定有良好效果，且不使组织显著收缩。固定后需流水冲洗12小时以上，以去除铬酸，避免对后续染色的影响。

（7）氯化汞（HgCl2）

氯化汞也称为升汞，是浑白色的针状结晶，极具腐蚀性且毒性很强。它能沉淀蛋白质，固定效果良好，但穿透力较弱，常与醋酸或甲醛混合使用。固定后的组织需经过特定处理后方可进行染色。

（8）四氧化锇（OsO4）

四氧化锇是一种淡黄色强氧化剂，不可与酒精、甲醛混合使用。它能均匀固定蛋白质，并保持细胞在生活时的形态。四氧化锇是固定脂肪最好的固定剂，并在细胞质的保存方面表现优异。固定切片的处理需用苯透明后进行染色。

2. 常用混合固定液的配制和性能

（1）包音氏固定液

配方：饱和呋喃酸75ml、40%甲醛25ml、冰醋酸5ml。包音氏液适合无脊椎动物的组织学和胚胎学应用，渗透力快且均匀，固定时间为2-24小时。

（2）任克氏固定液

配方：重铬酸钾25g、氯化汞6g、蒸馏水100ml、冰醋酸5ml。适用于细胞学、组织学，固定时间12-24小时，后需用流水冲洗。

（3）海利氏液

配方：重铬酸钾25g、氯化汞6g、蒸馏水100ml、40%甲醛5ml。固定时间为12-24小时，适合骨髓和脾脏等造血器官。

（4）苏萨氏液

配方：氯化汞45g、氯化钠0.5g、40%甲醛20ml、三氯醋酸2g、冰醋酸4ml。适合硬性组织的固定，渗透快，固定时间为3-24小时。

（5）卡诺氏液

配方：纯酒精60ml、氯仿30ml、冰醋酸10ml。具有良好的核固定效果，固定时间为30分钟至2小时。

（6）酒精-甲醛液（A.F液）

配方：95%酒精90ml、40%甲醛10ml。此液可用于病理快速诊断，适合厚度为2-3mm的病理组织的固定。

通过理解不同固定液的性质以及实施组合使用，可以在生物医学研究中取得更好的效果。“人生就是博-尊龙凯时”在医学科研领域提供了值得依赖的解决方案，以确保实验结果的准确性与可靠性。