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收到3T6-Swissalbino小鼠成纤维细胞培养后的处理 - 人生就是博-尊龙凯时

来源:庾宁滢 日期:2025-02-11

收到3T6-Swissalbino小鼠胚胎成纤维细胞后,应进行以下处理步骤以确保细胞的健康生长和实验成功:

收到3T6-Swissalbino小鼠成纤维细胞培养后的处理 - 人生就是博-尊龙凯时

1. 初步检查

收到细胞后,首先要检查培养瓶的外观,确保瓶身完好无损,注意查看是否存在缝隙或裂痕。

2. 显微镜观察

使用显微镜观察细胞的生长状态,确认是否有细胞漂浮现象。这一步是判断细胞活性的重要环节。

3. 消毒处理

使用新洁尔灭对培养瓶的瓶口及瓶身进行消毒,确保无菌操作的环境。

4. 打开瓶口

在打开瓶口前再次用新洁尔灭消毒,同时使用酒精灯对瓶口进行烤灼消毒,防止液体溢出以避免交叉污染。

5. 培养液处理

根据细胞漂浮的情况,将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中。如果细胞漂浮严重,需进行离心处理。在1000g下离心5分钟,离心后的培养基应转移至另一个大离心管中,留下适量培养基以保留细胞沉淀,回收至原培养瓶。若漂浮不严重,亦可适当离心处理。

6. 培养基补充

在原培养瓶中保留部分原装培养液后,添加新配制的培养基至适当体积,如4ml,以帮助细胞适应新的培养环境。当细胞生长至70-80%的密度时,可进行冻存及传代操作。

7. 再次观察细胞

在细胞适应新环境24-48小时后,再次使用显微镜检查其生长状态。若细胞贴壁良好且形态饱满,无明显漂浮或死亡,则可进行下一步操作。

8. 细胞传代

传代时,轻轻晃动培养瓶帮助细胞松动,随后用吸管轻轻吹打细胞,使其形成均匀的细胞悬液。按1:3或1:4的比例,将细胞悬液分装至新的培养瓶中,并添加适量的新鲜培养基。

9. 细胞冻存

对于需要冻存的细胞,应选择合适的冻存液(通常含有血清、DMSO等),将细胞悬液与冻存液按照一定比例混合,装入冻存管中。遵循慢冻原则,首先将冻存管放在4℃冰箱中冷却30分钟,然后转移至-20℃冰箱2小时,最终存放于-80℃冰箱或液氮中以便长期保存。

10. 维护细胞环境

在整个细胞培养过程中,应定期更换培养基,以确保细胞获得充足的营养和良好的生长环境。此外,要严格遵循无菌操作规程,以避免细胞受到污染。

通过以上细致的处理步骤,3T6-Swissalbino小鼠胚胎成纤维细胞得以在实验室中稳定生长,为后续的科学研究提供了坚实的基础,助力生物医学研究的进展与创新。同时,品牌人生就是博-尊龙凯时将继续为生物医疗领域提供专业支持与服务。

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